當(dāng)前位置：白介素2 ELISA試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)化操作流程與注意事項(xiàng)全解析
點(diǎn)擊次數(shù)：18 更新時(shí)間：2025-04-26
白介素2 ELISA試劑盒在檢測(cè)白介素2的含量方面具有重要應(yīng)用，以下為你詳細(xì)介紹其標(biāo)準(zhǔn)化操作流程與注意事項(xiàng)。
??一、操作流程??
1.??實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備??
準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)所需的各種器材、試劑等，確保試劑盒在有效期內(nèi)，且試劑儲(chǔ)存條件符合要求。
將試劑盒平衡至室溫，一般需30分鐘。
2.??樣本處理??
對(duì)待檢測(cè)樣本進(jìn)行適當(dāng)處理，如血清樣本需充分離心去除雜質(zhì)，細(xì)胞培養(yǎng)上清需經(jīng)過過濾除菌等。
3.??加樣??
在微孔板的相應(yīng)孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣本，每孔200μL，注意避免交叉污染。輕輕振蕩反應(yīng)板，使樣品充分混勻。
??4.孵育??
將反應(yīng)板置37℃溫箱中孵育1小時(shí)，讓樣本與包被的抗體充分結(jié)合。
5.??洗滌??
每孔加入350μL洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌3次，較后在濾紙上拍干。
6.??加酶標(biāo)物??
每孔加入酶標(biāo)物100μL，37℃溫箱孵育30分鐘。
7.??顯色與檢測(cè)??
加入顯色劑A、B液各50μL，37℃避光顯色15分鐘。接著加入50μL終止液，15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定OD值。
??二、注意事項(xiàng)??
1.操作過程要嚴(yán)格遵循無菌原則，防止樣本污染。
2.加樣時(shí)務(wù)必準(zhǔn)確，注意每一孔的添加量和對(duì)應(yīng)關(guān)系。
3.洗滌環(huán)節(jié)要完整，確保去除多余的底物和雜質(zhì)，但又不能過度洗滌致使抗體丟失。
4.不同試劑盒的孵育時(shí)間和溫度可能會(huì)略有差異，需嚴(yán)格按照試劑盒說明書執(zhí)行。
5.檢測(cè)過程中應(yīng)盡量避免強(qiáng)光直射，以防止OD值異常。
只要嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化流程操作并注意相關(guān)事項(xiàng)，就能運(yùn)用白介素2 ELISA試劑盒獲得準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)結(jié)果。
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